近日,國際學(xué)術(shù)期刊Nature Communications在線報道了華中農(nóng)業(yè)大學(xué)李興旺教授和李國亮教授團(tuán)隊合作完成的題為“Integrative analysis of reference epigenomes in 20 rice varieties”的研究論文。文章全面系統(tǒng)地描繪了20個水稻品種的表觀基因組圖譜,注釋了覆蓋水稻基因組82%的功能性DNA元件,作為水稻ENCODE計劃的重要組成部分,與該團(tuán)隊2019年發(fā)表水稻高分辨三維基因組圖譜(https://rdcu.be/b4rup)后一起,立體地呈現(xiàn)了水稻多層級的基因組結(jié)構(gòu)特征及其參與基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控等生命過程的潛在機(jī)理(從一維表觀基因組到3D基因組結(jié)構(gòu))。
研究者首先開發(fā)了一種快速和高效的ChIP-Seq實驗方法(eChIP-Seq)。和植物常用的ChIP-seq方法相比,eChIP-Seq的總體效率提升至少幾十倍以上,可用于鑒定水稻、擬南芥、玉米和甘藍(lán)型油菜等植物少量樣品的組蛋白翻譯后修飾和轉(zhuǎn)錄因子全基因組結(jié)合位點。
該研究產(chǎn)生了多達(dá)500多套組學(xué)數(shù)據(jù),覆蓋20個有代表性的水稻品種及其多個組織,包括58個基因表達(dá)數(shù)據(jù)(RNA-Seq),32個全基因組DNA甲基化圖譜(BS-Seq),354個各種組蛋白修飾數(shù)據(jù)(eChIP-Seq),58個全基因組開放染色質(zhì)區(qū)域圖譜(FAIRE-Seq),基于這些數(shù)據(jù)的整合性分析,作者從水稻表觀基因組圖譜定義了15種染色質(zhì)狀態(tài)。另外,通過ChIP-reChIP實驗,鑒定了一種新的H3K9me2/H3K4me1二價染色質(zhì)狀態(tài)。該染色質(zhì)狀態(tài)普遍存在于基因內(nèi)含子上,相關(guān)基因的表達(dá)量較低而且富集Copia轉(zhuǎn)座子,但其潛在的生物學(xué)功能有待深入研究。
研究者定義了活躍啟動子的染色質(zhì)特征和區(qū)域:即開放染色質(zhì)區(qū)域與H3K4me3修飾區(qū)域,大約為轉(zhuǎn)錄起始位點上游500 bp到下游1 kb,為啟動子的核心功能區(qū)域。結(jié)合水稻高分辨三維基因組圖譜分析,研究者發(fā)現(xiàn)水稻中存在大量的具有增強子活性的啟動子(enhancer-like promoters),揭示了啟動子不僅調(diào)控相鄰基因的表達(dá),還可以作為增強子,通過染色質(zhì)遠(yuǎn)程相互作用,調(diào)控遠(yuǎn)端與其互作基因的表達(dá)。